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离心式快速脱盐离心柱

规格
0.7ml/6ml
价格(RMB)
90/150.00

“90分钟一 步法”ELISA试剂盒,节约时间,减少污染,避免误差,高效灵敏

产品介绍


离心式快速脱盐预装柱,填料颗粒粒径在 57-80 微米,适合将分子量在 5000 以下的和分子量 5000 以上的物质分离开来,对盐和小分子的滞留率在 95%以上,几乎等体积回收,样品不会被稀释,可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持极高的回收率。无需装柱,代替比较耗时的传统透析处理,以达到快速纯化蛋白质/替换蛋白质缓冲液的目的。只需简单的几次离心,即可完成样品的脱盐或缓冲液置换实验。



产品用途


1、脱盐

2、置换缓冲液产品规格

柱体积:6 毫升; 上样量:0.5-2 工作环境

PH:2-13;温度:4-30ºC 存储液

存贮液含 20%乙醇



产品特点


1、操作方便,免去了繁琐的透析过程,10 分钟内即可完成样品处理。

2、建议一次性使用(也可再生后重复使用),稳定性好,在所用常用缓冲液体(PBS,Tris-Cl、碳酸钠-碳酸氢钠等)中稳定。

3、使用灵活,可根据自身样品体积来适当增减柱体积。



操作步骤

1、移去封口。将两端封口去掉,放入 50ml 离心管中。

2、离心去除储存液。选择水平转子适配器离心机,1000×g 离心 2min,去除储存液。

3、平衡预装柱。加入 5ml 样品所需的缓冲液,静置 30S,1000×g 离心 2min。再加入 2ml 上述缓冲液,重复上述平衡操作一次。

4、样品处理。加入需要处理的蛋白样品,静置 30S,1000×g 离心 2min,收集回收样品。

5、脱盐柱的再生和保存

将使用过的脱盐柱,2 次加入 3ml 0.5M NaOH 溶液,静置 2min,1000×g 离心 2min。然后 3 次加入 3ml 去离子水,静置 2min,1000×g 离心 2min。

将处理好的脱盐柱,加入 20%乙醇溶液,保存即可。



回收效果

样品脱盐后的回收率与样品的浓度,以及上样体积相关。样品浓度越高,其回收率越高;同时在推荐的样品上样量范围内,上样量约大,其回收率也会随之升高。通常脱盐后蛋白的回收率在 80-95%。


注意事项

1、样品处理量要在柱子处理范围内,过多会导致脱盐不完全,过少会导致样品回收率下降;

2、填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象,请勿将上述溶液进行过柱;

3、加样时尽量均匀加至管中心位置;

4、当样品浓度过低时,需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。


常见问题


常见问题

可能原因

解决方法

蛋白回收率偏低

1、蛋白浓度过低(<0.01mg/ml)

2、所置换的缓冲液成分或 PH 非最适缓冲液,产生了非特异性吸附

1、县对蛋白液进行适当浓缩后脱盐

2、更换适合的缓冲液,并充

分平衡预装柱 2-3 次

蛋白回收后出现浑浊或沉淀

1、缓冲液非最适缓冲液

2、缓冲液中的某些离子被除去了, 导致蛋白质等电点聚沉

更换适合的缓冲液,并充分平衡预装柱 2-3 次

脱盐不干净

盐离子浓度过高(>0.5M)

根据盐离子浓度适当增加脱

盐次数或稀释后脱盐


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