RIPA 裂解液(强)

▎ 产品简介

多种成分均可以从细胞中提取总蛋白 ，例如 Triton 、SDS、NP-40等 ，RIPA裂解液(强)(Enhanced RIPA Lysis Buffer )是采用一种经典的细胞组织快速裂解，并获得总蛋白的裂解液，其裂解强度大于NP-40裂解液、RIPA裂解液(中) ，所获得的蛋白质可以用于 Western ，免疫沉淀(Immunol Precipitation ，IP)等。

Enhanced RIPA Lysis Buffer主要由 Tris 、NP-40、sodium deoxycholate 等组成，并含有多种蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

▎  注意事项

1 、去除贴壁细胞的培养液后，如果血清中的蛋白没有干扰，可以不用清洗。

2 、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。

3 、如果细胞量较多，必需分装成 50～100 万细胞/离心管，然后再裂解，大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。

4 、如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通 过强烈 Vortex使样品裂解充分，然后同样离心取上清用于后续实验，直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器裂解的充分。

5 、Enhanced RIPA Lysis Buffer含有特殊成分，在低温情况下有可能出现浑 浊现象，可 37℃水浴促其溶解，不影响使用效果；溶解时间不易过长，避免成分失效，4度保存即可，长期不用亦可-20℃保存。

6 、PMSF溶液可置4℃保存 1~2周，-20℃可保存1年以上，室温放置2天即可能失效。

7 、裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象，该透明胶状物 为含有基因组 DNA 等的复合物，在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白 的情况下可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别 紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。

8 、细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或4℃进行。

有效期：12个月有效；4℃运输，-20℃保存(PMSF溶液)。