▎产品简介:
λ噬菌体是最早使用的克隆载体,其基因组是长度约为 50kb 的双链 DNA 分子,其在宿主细胞由两种生活途径:1、裂解生长:环状 DNA 分子在细胞内多次复制,合成大量噬菌体基因产物,装配成噬菌体颗粒,裂解宿主菌再进行下一次感染;2、溶源性生长:感染 细胞内λ噬菌体 DNA 整合到宿主菌染色体 DNA 中与之一起复制,并遗传给子代细胞,宿 主细胞不裂解。科研人员常常利用λ噬菌体裂解生长的特点,培养获取大量的λ噬菌体颗粒, 并提取λ噬菌体 DNA。噬菌体载体广泛用于文库筛选,目的克隆培养获得大量的噬菌体颗 粒需要提取λ噬菌体 DNA 来开展测序等后续工作。
λ噬菌体裂解培养物离心后的上清, 首先用 RNase A /DNase Ⅰ混合酶消化去除残留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌体,通过酚异戊醇等提取,残留碎片通过沉淀离心去除,通过一系列快速的漂洗、离心的步骤,将 盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,获得 DNA 的量很高,但是纯度一般,但是足够用于大多数分子生物学实验。λ噬菌体基因组 DNA 提取试剂盒(PEG 沉淀法)是简便的λ噬菌体基因组 DNA的试剂盒,其提取原理是通过 PEG 沉淀、酚异戊醇等提取,残留碎片通过沉淀离心去除, 通过一系列快速的漂洗、离心步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,即可获得λ噬菌 体基因组 DNA,可进行酶切、PCR 等下游实验。仅用于科研领域,不用于临床诊断或治疗。