乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒

▎ 产品简介

乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH 或 LD)，是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的胞质中，正常情况 下不能透过细胞膜；当细胞受损伤时，膜通透性增强，LDH 即被释放到胞外。细胞质内 LDH 减少，培养液中 LDH 增 多，测定培养液中 LDH 活性或 LDH 漏出率即可反映药物的细胞毒性。 LDH 属于氧化还原酶，能可逆的催化乳酸(L)和丙酮酸(P)之间的氧化还原反应。其反应公式：乳酸+NAD +→丙酮 酸+NADH+H +。其中：L→P 为正向反应；P→L 为逆向反应。
  乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒其检测原理是以 NAD 为受氢体，LDH 催化乳酸脱氢生成丙酮酸，丙酮酸再 与二硝基苯肼反应生成丙酮酸二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度呈正比，可用酶标仪 检测 440nm 处的吸光度，通过公式可以计算出细胞毒性时释放的 LDH 活性或检测其他样品中的 LDH 活性。本试剂 盒可用于常规的 LDH 活性的检测，更常用于以 LDH 释放为指标的细胞毒性的检测。该试剂盒仅用于科研领域。 

▎  注意事项

  1、培养细胞时要用无血清或低浓度血清的培养液，以排除血清的干扰，否则会有偏差。
  2、EDTA 对 LDH 有抑制作用，操作中避免使用或尽量彻底清除含 EDTA 的试剂。
  3、LDH 尽可能现取现测，如收集的细胞培养液放置时间较长，可能使 LDH 的活性降低。
  4、同一批试验尽量用同一次配置的溶液，溶液的使用量应统一，反应时间也应一致。
  5、酶促反应中，上清液取样量以 5~20ul 为宜，。如果样品中酶活性过高，可减少样品用量或适当稀释后再行测定。
  6、显色后应在 15min 内测定完成。
  7、碱性显色液有一定腐蚀性，请小心操作。 

▎  有效期

12 个月有效。