▎ 产品简介
磷酸钙法细胞转染试剂盒(Calcium Phosphate Cell Transfection Kit),在传统的磷酸钙细胞转染 方法的基础上进行了改良,提高了转染效率,并降低了毒性。外源基因导入真核细胞的方法有很多种,如磷酸钙 转染法、DEAE-葡聚糖转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。 ZCIBIO 磷酸钙法细胞转染试剂盒(Calcium Phosphate Cell Transfection Kit)是在传统的磷酸钙细胞转染方法的基础上进行了改良,提高了转染效率,并 降低了毒性,可用于磷酸钙法转染细胞,不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定株。HEK293 是最适合磷酸钙法转染 的细胞之一,优化条件后转染效率可以高达 85%以上,一般的转染效率可达 40~50%左右。其他常见细胞(例如 Hela、CHO 细胞等)也适合磷酸钙法转染,但效率比 293 细胞要略低一些。
本转染试剂盒主要适合于大多数贴壁 细胞的转染,也可于一些悬浮细胞的转染,一般要求 DNA 浓度在 10~50μg 为宜,Hela、BALB 等细胞沉淀放置 16h,CHO、DUKX、BⅡ等细胞可以通过甘油、DMSO 进行热休克处理以提高转染效率。
▎ 注意事项
1.注意无菌操作,尽量避免污染,同时 DNA 不应含有蛋白和酚。
2.休克处理某些细胞系会使转染效率大大提高,但应注意甘油暴露过久易导致细胞死亡。
3.转染 12-24h 后,可以加入浓度为 10mmol/L 的丁酸钠溶液,可以提高病毒滴度。
4.BBS solution 的 PH 值直接关系到转染效率,尽量避免长时间暴露再空气中,以免被空气中的二氧化碳酸化。
▎ 有效期
12 个月有效。