▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
甲状腺激素(三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4))绝大部分是与血浆蛋白(甲状腺素结合球蛋白(TBG)、甲状腺素结合前清蛋白(TBPA)、血清白蛋白(Alb))相结合,仅约0.3%的体内发挥甲状腺激素特有的生理功能。故测定血中游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、FT4的浓度更能反映甲状腺的功能和状态。
▎ 检测原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测技术。生物素标记合成的T3类似物,它的主要特点是在免疫反应中,不与TBG结合,又具有与甲状腺抗原相同的抗原性,在竟争抑制反应中,一定量的抗体与生物素标记的T3类似物及非标记抗原(校准品或标本)进行竟争反应,抗体与生物素标记合成的T3类似物结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物素标记合成的T3类似物结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物素化T3类似物,再加入酶标记的亲合素,形成固相抗体-生物素化T3类似物-酶标-亲合素的复合物,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中FT3的浓度成反比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 竞争法ELISA(定量) |
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 大鼠 |
检测范围 | 1--32pmol/L |
灵敏度
| 0.1pmol/L |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。