▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
硫氧还蛋白(Trxs)是一群广泛存在于所有活细胞中的小分子蛋白, 是细胞氧化还原平衡的关键调节者。 哺乳动物的 Trx 家族有三个成员: Trx-1、 Trx-2 和 TrxL。 Trx-1 是唯一一个存在于细胞外的硫氧还蛋白, 由淋巴细胞、 肝细胞、 成纤维细胞和多种肿瘤细胞分泌产生。 血浆中 Trx-1 的浓度可达到 6 nM。它主要存在于细胞的细胞质中, 少量存在于细胞核以及与细胞外表面相关的地方。在各种应激条件下如缺氧、 过氧化氢浓度升高、 光化学氧化应激、病毒和细菌感染, Trx-1 的表达增加。 Trx-1 的生物学功能包括生长因子活性、抗氧化性能、 提供还原当量的辅因子和转录调控。类风湿性关节炎患者的滑膜组织在氧化应激条件下,其 Trx-1 水平增加。 血浆中 Trx-1 水平与疾病的严重程度有关, 表明 Trx-1 可作为病理条件的生物标志物。
▎ 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人Trx-1单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的Trx-1与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中Trx-1的浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 双抗夹心ELISA(定量)
|
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 人
|
检测范围 | 46.88-3000pg/ml |
灵敏度
| 4.0pg/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。