▎ 超敏M-ELISA系列
ZCIBIO超敏M-ELISA试剂盒通过严格的性能检测,以满足客户对精确性,特异性,准确度和灵敏度的要求。
▎ 实验背景
Interleukin-12,IL-12,白介素 12。IL-12 对免疫的多向性调节作用,所具有的促进γ-干扰素分泌和增强 TH1 细胞的能力,使其具有抗感染、抗肿瘤和抗移植器官的功能。和大多数白介素不同的是,活性 IL12(P70)是由一条重链(P40)和一条轻链(P35)构成的二聚体。P40 由严格限定的细胞合成,P35 则很多细胞都可产生。但活性 IL12 只能由同时可合成 P40、P35 的细胞产生。这些细胞内常常 P40 产量高于 P35,以至有大量 P40 同聚体形成。鼠的 P40 同聚体无活性,但能结合 IL12 受体,相当于活性 IL12 的拮抗剂。在人体这一现象不明显。
▎ 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-12P40 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 IL-12P40与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中 IL-12P40的浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
▎ 数据参数
实验方法
| 双抗夹心ELISA(定量)
|
规格 | 96T(可拆卸) |
反应性
| 人
|
检测范围 | 31.25-2000 pg/ml |
灵敏度
| 2.0 pg/mL |
上样体积 | 50 μL/孔 |
样本类型 | 血清、血浆、组织、细胞上清或其他生物样本 |
敏感性/最低检测浓度计算方式 | 敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性 |
变异系数
| 板内变异系数<10%,板间变异系数<15% |
回收率 | 85%-115% |
保存条件 | 未开封试剂盒,4℃保存;已开封,标准品-20℃保存,酶标板加干燥剂后密封-20℃保存,其他4℃保存 |
有效期 | 6个月。 |
▎ 标曲图
▎ 实验所需自备物品
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS,试剂盒内提供足量)
注:样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。