动物基因组DNA快速提取试剂盒ㅣ茁彩生物

动物基因组DNA快速提取试剂盒适合于从新鲜或冻存组织，如培养的哺乳动物细胞，血液，唾液，毛发（含羽毛），鼠尾及鼠耳等动物组织中快速提取基因组DNA，用于后续的基因 型鉴定等PCR分析检测。

操作步骤：

提前准备可设置恒定温度为 55℃和 95℃的热盖金属浴或者PCR仪；提取试剂A在 2~8℃条件下会出现絮状（结晶）沉淀，为正常现象，试剂平衡至室温后可自行消失，不影响使用；使用前取出所有试剂于室温下平衡，颠倒混匀后备用。

1. 消化液的配制：按照样本数量n配制消化液，具体配制方法如下：分别吸取（n× 50µL提取试剂A+n× 2.5µL提取试剂B）加入洁净离心管中，移液器吹吸充分混匀，分装至 0.2mL PCR（离心管）中，每孔 52µL（如样本过多，可提前预制，于 2~8℃短暂保存，2 小时内使用）。

2. 不同组织样本基因组DNA的提取：

培养的哺乳动物细胞：将收集到的细胞彻底除去培养液，吸取消化液充分吹吸重悬细胞后，转移至原消化液孔中。

血液/唾液：吸取不超过 10µL的血液或者唾液加入消化液中，移液器吹吸混匀。

毛发（含羽毛）：实验前用 75%的乙醇冲洗剪刀和镊子。剪除毛发（含羽毛）的多余部分，仅需保留毛发的根部（羽轴中羽根）区域，并将其尽可能剪碎至消化液中，移液器吹吸混匀。鼠尾/鼠耳：实验前用 75%的乙醇冲洗剪刀和镊子。剪取不超过 0.5cm的小鼠尾尖或耳尖，并将其尽可能剪碎至消化液中，移液器吹吸混匀（一般情况下，重量约为 10mg的 0.5cm长的鼠尾或鼠耳刚好能浸没在含有 50μL消化液的PCR管中）。对于新鲜的鼠尾或鼠耳，建议尽量在剪下鼠尾或鼠耳后 30 分钟内进行基因组DNA提取，否则宜尽快冷冻存放。

3. 将样本置于 55℃热盖金属浴或者PCR仪，孵育 10 分钟。

4. 将样本置于 95℃热盖金属浴或者PCR仪，孵育 5 分钟（孵育结束后，组织未完全消化属于正常现象，不会影响试剂盒的检测效果）。

5. 将上述提取样本置于-20℃冷却 5 分钟，或 4℃冷却 15 分钟以上，以最大程度避免气溶胶污染，瞬时离心后取上清立即进行PCR检测（若需长期保存样本，应将未消化的组织去除或将提取物转移到新的离心管中。大部分情况下，提取物 4℃能保存至少 1 个月，-20℃至少能 保存一年）。